前期準(zhǔn)備

 

儀器調(diào)試：先將儀器放置在水平穩(wěn)定的工作臺(tái)，連接電源和配套電腦，安裝對(duì)應(yīng)的驅(qū)動(dòng)與操作軟件后啟動(dòng)設(shè)備。首次使用或長(zhǎng)期閑置后，讓儀器預(yù)熱1-2分鐘穩(wěn)定光學(xué)系統(tǒng)；若儀器挪動(dòng)過(guò)，還需在軟件中重新調(diào)節(jié)對(duì)焦距離等基礎(chǔ)參數(shù)。

 

樣本制備：對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶溫和消化后終止反應(yīng)，懸浮細(xì)胞則直接輕柔吹打，避免細(xì)胞團(tuán)聚；若需區(qū)分活死細(xì)胞，按1:1比例將細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液混合，染色后1-2分鐘內(nèi)盡快檢測(cè)。同時(shí)確保細(xì)胞濃度在儀器檢測(cè)范圍（通常1×10?-1×10?cells/mL），過(guò)高需梯度稀釋，過(guò)低可離心濃縮。

 

樣本加載與參數(shù)設(shè)置

 

加載樣本：取儀器專用計(jì)數(shù)板，用移液器吸取10-25μL制備好的細(xì)胞懸液，垂直滴加至計(jì)數(shù)板的加樣孔，借助毛細(xì)作用填充計(jì)數(shù)腔，過(guò)程中避免產(chǎn)生氣泡和觸碰計(jì)數(shù)腔表面。隨后手持計(jì)數(shù)板兩側(cè)，按儀器標(biāo)識(shí)的方向平穩(wěn)插入進(jìn)樣口，直至卡入到位。

 

參數(shù)選擇：在軟件界面根據(jù)樣本類型（如哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母細(xì)胞）和檢測(cè)需求（如明場(chǎng)計(jì)數(shù)、熒光計(jì)數(shù)）選擇預(yù)設(shè)應(yīng)用模板。若為自定義檢測(cè)，可手動(dòng)調(diào)整細(xì)胞直徑范圍、活死細(xì)胞判別閾值，熒光型號(hào)還需匹配對(duì)應(yīng)熒光通道。

 

啟動(dòng)檢測(cè)與結(jié)果核對(duì)

 

開(kāi)始計(jì)數(shù)：參數(shù)設(shè)置完成后，點(diǎn)擊軟件上的“計(jì)數(shù)”或“開(kāi)始實(shí)驗(yàn)”按鈕，儀器會(huì)自動(dòng)完成對(duì)焦、圖像捕獲和分析，整個(gè)過(guò)程通常在數(shù)十秒內(nèi)完成。部分儀器檢測(cè)結(jié)束后計(jì)數(shù)板會(huì)自動(dòng)退出，需及時(shí)取出。

 

結(jié)果核對(duì)：重點(diǎn)查看軟件顯示的細(xì)胞標(biāo)記圖像，確認(rèn)活死細(xì)胞的標(biāo)記是否準(zhǔn)確，排查是否有雜質(zhì)被誤判為細(xì)胞或細(xì)胞漏判的情況。同時(shí)查看核心數(shù)據(jù)，如總細(xì)胞濃度、活細(xì)胞率、平均細(xì)胞直徑等，若結(jié)果異常，可調(diào)整參數(shù)后重新檢測(cè)。

 

數(shù)據(jù)處理與儀器清理

 

數(shù)據(jù)保存：確認(rèn)結(jié)果無(wú)誤后，將數(shù)據(jù)按需求導(dǎo)出為PDF、CSV等格式，標(biāo)注樣本名稱、檢測(cè)時(shí)間等信息以便存檔，部分儀器支持插入U(xiǎn)盤導(dǎo)出數(shù)據(jù)，也可直接在軟件中查看歷史檢測(cè)記錄。

 

后續(xù)清理：將使用過(guò)的計(jì)數(shù)板按生物危害廢棄物規(guī)范處理；若儀器載物臺(tái)或進(jìn)樣口有液體濺出，用無(wú)絨軟布輕輕擦拭，定期清潔儀器光學(xué)窗口，保障后續(xù)檢測(cè)精度。最后按流程關(guān)閉軟件和儀器電源，整理好實(shí)驗(yàn)耗材。